EyeWorld Korea March 2018 Issue

March 2018 EWAP FEATURE 15 처리를 연습하는 것을 권장합니다. 연습 을 할 때는 이전에 당뇨병 병력이 없는 55세 이상 기증자의 각막을 사용하는 것이 좋습니다. 연습 과정에서 데스메막 이어떻게움직이는지를느끼고, 열상발 생 전까지 어느 정도의 외력을 버틸 수 있는지 확인해야 합니다. DMEK 조직 처리는 특별한 장비 없 이, 몇 개의 천공 펀치와 마이크로핑거 장비들만을 사용하여 진행할 수 있다 는 것이 장점입니다. 변형 SCUBA 기법 을 사용하면 DMEK 조직을 안전하고 효 율적으로 처리할 수 있습니다. Mohit Parekh, PhD (research scientist, Veneto Eye Bank Foun- dation, Venice, Italy) and Massimo Busin, MD (Department of Ophthal- mology, Villa Igea Hos- pital, Forli, Italy) 1. 이식을 위해 공여자 각막 조직을 처 리하기 전 내피세포 밀도(ECD) 및 내피세포 사망률을 확인합니다. 저 희안구은행에서는 DMEK에적합한 기준을 ＞ 2,200 cells/mm 2 , 사망률 ＜ 2% 로 고려하고 있습니다. 2. 미세한 변경 및 조정을 위해서는 SCUBA 기법을 아래와 같이 시행합 니다. 3. 내피세포 쪽 측면이 위를 바라보는 상태에서 진공 상태를 만들어, 조직 을 석션 블록에 고정시킵니다. 4. 공여자의 천공 조직(9.5mm)을 내피 세포 표면에 부드럽게 올려놓아 표 면을 절개합니다. 5. 절개 마진은 trypan blue(0.25%)로 염색하여 육안으로 확인할 수 있게 합니다. 염색약은 인산 완충 생리식 염수(PBS)로 씻어냅니다. 6. 주변부 내피세포를 제거하고, 남아 있는 중심부 내피세포와, 주변부 내 피세포 절개 후 남은 기질을 시각적 으로 구분하기 위해 조직을 다시 염 색합니다. 7. 내피세포 위에 조직 배양액을 몇 방 울 떨어뜨려, 세포를 지속적으로 촉 촉하게 유지해 줍니다. 8. 오목한 평면을 확인하기 위해 오목 후크를 사용하여(360도 각도로 원주 를따라방사상으로이동) DMEK 이 식편을 말단부에서 분리합니다. 9. 말단부 직경이 1.2mm 정도인 포셉 들을 사용하여 조직을 위쪽에서 아 래쪽 방향으로 벗겨냅니다. 데스메 막이 기질에 붙어있는지 여부에 따 라 싱글 필링(single peel) 방식 또는 쿼드런트(quadrant) 방식 중 하나를 선택하여 진행할 수 있습니다. 조직 이 단단하게 부착되어 있다면 쿼드 런트 방식 또는 진자 방식(우측에서 좌측으로 부드럽게 움직이며 이식편 을 분리한 후 필링을 시작)을 사용할 수 있습니다. 10. DMEK 조직을 작은 경첩 부위만 남 기고 80-90% 정도 벗겨냅니다. 이 조직은 각막 내로 재위치 시키지 않 습니다. 11. 작은(2.0mm) 피부 생검 펀치를 사 용하여 기질을 천공 시킵니다. 필링 이 완료된 DMEK 조직을 멸균 스펀 지를 사용하여 각막에 재위치 시키 고, 액체의 흐름을 역류시키고 각막 에 안착할 수 있도록 합니다. 12. 진공 흡입을 통해 전체 각막 조직을 뒤집어 상피세포 쪽 측면이 위를 바 라보게 합니다. 13. 구멍을 뚫은 기질 부위를 제거하고, 기질 위에 놓인 DM을 노출시킵니다. 14. 오목 후크를 스킨 마커로 칠한 후, DM에는 "F" 표식을 합니다. 15. 구멍을 뚫은 기질 부위를 각막에 다 시 거치합니다. 16. Trypan blue 염색을 20초간 내피세 포 상층부에 시행한 후 즉시 PBS로 씻어냅니다. 17. ECD, 조직의 모양, trypan blue 양 성 세포를 평가 및 측정하기 위해 각 막 조직을 수크로오스(저장성 용액, 1.8%)에 담가 둡니다. 18. 각막 클로(claw)로 조직을 고정한 후 선적을위해운반배지에저장합니다. Veneto Eye Bank Foundation에 서는 2014년 5월 이래 총 527개의 DMEK 조직들을 처리했습니다. 1% 미만에서 trypan blue 양성 세포들 이 관찰되었습니다. 중심부 또는 말 단부 열상, 데스메막 분리 등으로 인 해 조직을 사용하지 못하게 된 비율 은 6% 미만이었습니다. 조직을 사용 하지 못하게 되는 비율이 낮고 이식 편의 품질이 뛰어나기 때문에 Vento Eye Bank Foundation은 DMEK 조 직 처리 기술의 선두 주자로 자리매 김하고 있습니다. 이전에 심각한 당 뇨병을 앓았거나, 말굽 모양의 열상 이 발생했거나, 이전에 백내장 수술 을 받았던 복잡한 병력의 공여자 조 직의 경우도 위에 서술한 기법을 통 해 충분히 처리할 수 있습니다. 1 Mauricio Perez, MD (Santiago, Chile) 저는 전임자인 David Rootman, MD, 로부터 DMEK 조직 처리 방법을 배웠으며, 그의 기술에 몇 가지 변경 사 항들을 추가하여 사용하고 있습니다. 제가 조직을 처리할 때 주변부 조 직 열상이 일부 발생했기에(방사상, 원 주상 모두), 내피세포 박리에 앞서 공막 돌기를 해리 시키는 기법을 개발했습니 수술 6일 후 20/20 시력을 회복한 DMEK 수술 사진. 잔여 기포가 여전히 관찰된다. Source: Mark A. Terry, MD continued on page 16